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2015临床医师免疫学测试的研究:自然杀伤单元的测试

    自然杀伤单元的测试

    NK单元表面至少存在CD2、CD11b、CD11c、CD16、CD56和CD69各种抗原,如,但他们都没有NK单元是独1无二的,所通过现在很少有人CD完成指标的系列抗原的鉴定和计数NK单元,还有更多的测试NK单元活性。NK单元株为靶单元,并对小鼠进行了实验NK利用单元活性YAC单元株,有各种各样的测试方法,两者各有优缺点。

    (1)形状法

    测试原理是将效应单元和靶标按1定出现例混合,然后是台盼蓝也许艾红Y耐染色异种单元的染料处理,然后分别计数染色死亡单元和未染色活单元,从这个计算NK单元的杀伤活性。该方法简单、简单,易学,然而,由考官对死单元和活单元的主观因素进行判断是不可避免的,我数不清轻微受损的单元。

    (二)酶释放法

    测试原理是将1定出现例的效应单元与靶单元共温1段时间,离心沉淀,取培养液测试靶单元破坏后释放的乳酸脱氢酶也许碱性磷酸酶的含量。本法的经济性、快速而简单,但它是可通过量化的。缺点是靶单元中碱性磷酸酶含量较低,也许部分不死单元可自行释放,从而影响了该方法的灵敏度和特异性。此外,乳酸脱氢酶分子也很大,只有当目标单元膜被完全破坏时才释放,因此,这种效应的作用不能较早地反映出来。

    (三)荧光法

    测试原理是用荧光素标记靶单元,在装备了效应单元后,,离心清洗,荧光仪测试残留活靶单元的荧光,缺点是活单元释放的荧光常被效应单元和培养基破坏。其他,荧光分析表明,单元的自然释放速率较高,荧光本底强,影响灵敏度。为了克服上述障碍,时间分辨荧光免疫分析法,靶单元用镧系元素铕(Eu3+)螯合标记,用同样的方法用效应单元武装好后,,时间分辨荧光仪测试荧光,非特异性荧光背景可通过被去除。该方法实验时间短,作用靶单元只需共同温度即可2h,测试速度快,强特异性。

    测试原理是将效应单元和靶单元按1定出现例混合孵育,直接测试靶单元。有靶胞质释放法和单元核释放法。

    1.单元质释放法是常用的方法51Cr释放法。51Cr通过单元膜与单元质中的中、小分子蛋白质结合,1旦单元膜被破坏,,蛋白质同位素溢出,也不会再被完整的单元吞食。该方法简便、快速、定量,缺点是天然释放率高,所需的目标单元格数量很大,51Cr短暂半衰期。近几年有用111In(铟)测试NK单元活性,优点是打分率高,剂量小,通过γ射线辐射,释放90%它自己的能量,出现51Cr高101次,低自然释放速率,仅仅 51Cr1半。

    2.核释放法是常用的方法3H-TdR也许125IudR完成DNA合成前驱体,可通过被摄取到靶核中。当效应单元和目标单元处于怯懦状态时,,用胰蛋白酶和.DNA酶处理释放受损核内物。该方法的自然释放速率出现51Cr低,长半衰期,该方法灵敏度高,因此,它被大多数实验室采用。

    (四)化学发光法

    测试原理是当效应单元与目标单元接触时,,效应单元呼吸爆发,产生极不稳定O2-和OH-等,释放光子,在发光剂的存在下,可被电1次增管接受和计数,发光量NK单元杀伤能力与。

    然后,测试NK单元活动的方法有很多种,这种方法的简单性有很大的不同,但敏感性和特异性也不同,从简单活单元计数到最先进的流式单元术分析,1般情况下,可通过根据实验要求和具体条件进行选择。

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